As técnicas utilizadas na produção dos transgénicos consistem essencialmente na manipulação genética mas mesmo assim existem métodos inadequados como transformação de pólen, macronjecção, electroforense, incubação de sementes, embriões, tecidos ou células em DNA, tratamento com microlaser, entre outros. Dos métodos experimentais de maior sucesso evidenciam-se a micronjeção, técnica de DNA Recombinante, transferência de genes mediante de um vector, transferência de genes por bombardeamento de partículas, microporação, ou seja, métodos que a natureza por si própria não consegue executar.
Cada um destes métodos terá o seu grau de eficácia e o seu custo associado portanto as empresas quando estão a trabalhar em algo procuram encontrar o método mais eficaz e de menor custo para possuírem elevado lucro financeiro.
A Técnica de DNA Recombinante consiste na extração do DNA do individuo que tem falta de uma característica especifica e também se extrai o DNA de um individuo que contem essa característica. Com a ajuda de enzimas de restrição, ou seja são enzimas que catalisam a fragmentação do DNA em porções menores ficando o DNA repartido pronto a ser ligado ao outro DNA que sofreu o mesmo processo. Assim as duas porções finais vão se ligar através de enzimas ligase que são colocadas num meio específico e deste modo optem-se o DNA do individuo com a característica pretendida. E associado a esta técnica temos a transferência de genes mediante de um vector, ou seja um plasmídeo que possui extremidades coesivas, zonas onde se pudera ligar as extremidades coesivas do Gene especifico e este plasmídeo em meio de cultura ira-se associar a bactérias que possuíram o gene humano.
O Bombardeamento de partículas consiste em acelerar, através de um aparelho, a altas velocidades as micropartículas de um metal, que foram revestidas por DNA que contêm os genes específicos. Também este “canhão de genes” irá bombardear o tecido vegetal que vai sofrer uma alteração. As partículas penetram dentro das células, e assim libertam os fragmentos de DNA. Adquirindo as células os genes específicos.
O PCR (Reacção em Cadeia Polimerase) permite obter várias copias igual de DNA, replicando-o. Esta técnica veio possibilitar novas estratégias no âmbito da tecnologia do DNA recombinante.
Métodos de transferência de Genes:
Em animais:
1. Microinjecção de DNA linear no pronúcleo;
Injecção de moléculas de DNA linear para óvulos fecundados/ovos (fase pronuclear) com um microscópio invertido, equipamento de micromanipulação e aparelhos de injecção.
Imagem 1 – Microinjecção de DNA
2. Transferência de células embrionárias para blastocistos;
Células embrionárias são derivadas de células de blastocistos normais. Estas células são polipotentes, isto é, que se podem desenvolver em qualquer tipo de tecido. Ao remover as células embrionárias da cultura e ao colocar-se novamente dentro do embrião (blastocisto), permite a divisão das células e tornam-se partes do embrião. A transfusão permite inserir, in vitro, DNA estranho nas células. Após a inserção in vitro do DNA pretendido, analisa-se o material em estudo a ver se as células “aceitaram” o DNA, e se sim coloca-se as células em blastocistos.
Todavia coloco 2 vídeos para que o que foi retratado em cima seja mais explícitos, mostrando assim com pormenor o que realizam em laboratório pois existem inúmeras técnicas e métodos dos quais muitos ainda não foram divulgados e outros são de uma compreensão científica muito elevada.
Bibliografia:
Sem comentários:
Enviar um comentário